جمع وتخزين وتحليل البيانات.
توزيع الكواشف ، وسائل الإعلام ، أدلة المختبرات.
شراء معدات.
الإشراف على المختبرات الطرفية.
إجراء مخطط خارجي لتقييم الجودة (EQAS) للمختبرات الطرفية.
للمشاركة في نظام تقييم الجودة المنظم من قبل المختبرات المركزية / المركزية.
إرسال عينات إلى مختبرات أعلى / مرجعية لتوصيف عزل / تأكيد التشخيص.
العاملين
أخصائي علم الأمراض المؤهل / الميكروبيولوجي
(دكتور في الطب / دبلوم في علم الأمراض السريرية)
الفنيين
DMLT (دبلوم في تكنولوجيا المختبرات الطبية) من ذوي الخبرة
مساعدو المختبرات (DMLT)
قابلات المختبرات
منظف
كاتب بوضعه في أمين مخزن
نظرًا لأنه قد لا يكون من الممكن وجود اختصاصي في علم الأوبئة بدوام كامل ، فيجب أن تتوفر على الأقل مساعدة بدوام جزئي من أخصائي علم الأوبئة.
الرجعية
مجهر مجهر 2 مقياس الألوان 1
مجهر الحقل المظلم 1 ثلاجة 1
غرفة التلقيح 2 أرصدة 2
جهاز طرد مركزي 2 متر pH 1
الأوتوكلاف 2 مثخن 1
الحاضنة 2 جهاز ماء Distil 1
فرن الهواء الساخن 1 Micropipettes حسب حجم العمل
حمام مائي 2 نصائح لالماصات حسب حجم العمل
VDRL شاكر 1
يبدأ التشخيص المختبري للأمراض المعدية بجمع عينة سريرية لفحصها أو معالجتها في المختبر (الفحص الصحيح ، الذي يتم جمعه في الوقت المناسب ، ونقله بالطريقة الصحيحة إلى المختبر الصحيح). إن الجمع السليم للعينة السريرية المناسبة هو الخطوة الأولى في الحصول على تشخيص مخبري دقيق لمرض معدٍ. يجب أن تكون المبادئ التوجيهية لجمع ونقل العينات متاحة للأطباء في شكل مكتوب بشكل واضح.
يجب أن تؤكد المبادئ التوجيهية على جانبين مهمين:
جمع العينة قبل إدارة العوامل المضادة للميكروبات.
منع تلوث العينة بالكائنات الموجودة خارجيا أو الفلورا الطبيعية للجسم.
جمع ونقل العينات
تطبيق تقنيات صارمة التطهير في جميع أنحاء الإجراء.
اغسل يديك قبل وبعد الجمع.
جمع العينة في المرحلة المناسبة من المرض.
تأكد من أن العينة تمثل العملية المعدية (على سبيل المثال البلغم هو عينة من الالتهاب الرئوي وليس اللعاب) وكميات كافية لإجراء الاختبارات المطلوبة.
اجمع العينة أو ضعها بشكل معقم في حاوية معقمة و / أو مناسبة.
تأكد من أن خارج حاوية العينة نظيفة وغير ملوثة.
أغلق الحاوية بإحكام حتى لا تتسرب محتوياتها أثناء النقل.
قم بتسمية وتاريخ الحاوية بشكل مناسب وأكمل نموذج الطلب.
ترتيب النقل الفوري للعينة إلى المختبر.
معايير لرفض العينات
يجب أن يتم تطوير المعايير من قبل المختبر على أساس أن معالجة العينة قد لا يتم من قبل المختبر. وفيما يلي بعض الأمثلة على ذلك:
هوية مفقودة أو غير كافية.
كمية غير كافية.
عينة جمعت في حاوية غير ملائمة.
التلوث مشتبه به.
نقل أو تخزين غير مناسب.
تأخير غير معروف
عينة الدم المشوهة.
مجموعة من العينات
لا تعكس الحالة السريرية للمريض بالضرورة نتيجة التحاليل المخبرية على الرغم من الأداء المخبري الصحيح إلا إذا كانت العينة في الحالة المثلى المطلوبة للتحليل. تم وصف بعض العينات المهمة وطرق جمعها ووسائل النقل المناسبة هنا لضمان الجودة.
دم
الدم الكامل مطلوب للفحص البكتريولوجي. مصل مفصول عن الدم يستخدم للتقنيات المصلية. إن إزالة الجلد من أهمية بالغة في وقت جمع العينة. صبغة اليود (1-2 ٪) ، بوفيدون اليود (10 ٪) و الكلورهيكسيدين (0.5 ٪ في 70 ٪ كحول) هي عوامل مثالية. ومع ذلك ، قد يكون بعض الأفراد فرط الحساسية لليود الموجود في بعض هذه.
أثناء جمع الدم للثقافة ، يجب تذكر النقاط التالية:
جمع الدم خلال المراحل الأولى من المرض لأن عدد البكتيريا في الدم أعلى في المراحل الحادة والمراحل المبكرة من المرض.
جمع الدم خلال نوبة الحمى لأن عدد البكتيريا أعلى في درجات الحرارة المرتفعة في المرضى الذين يعانون من الحمى.
في غياب إدارة المضادات الحيوية ، يمكن رؤية إيجابية 99 ٪ للثقافة مع ثلاث ثقافات الدم.
عادة ما يكون لدى الأطفال الصغار عدد أكبر من البكتيريا في دمهم مقارنة بالبالغين ، وبالتالي يجب جمع كمية أقل من الدم منهم (الجدول).
الجدول: حجم الدم الواجب جمعه في أعمار مختلفة
حجم العمر في زجاجتين
<2 سنة 2 مل
2-5 سنوات 8 مل
6-10 سنوات 12 مل
> 10 سنوات 20 مل
السائل النخاعي (CSF)
فحص CSF هو خطوة أساسية في تشخيص أي مريض مع دليل على تهيج سحائي أو المخ المصاب. يتم جمع ما يقرب من 3-10 مل من السائل الدماغي النخاعي ويستخدم جزء منه للفحص البيوكيميائي والمناعي والمجهري ويبقى للفحص البكتريولوجي أو الفطري. يجب اتخاذ الاحتياطات الهامة التالية لجمع ونقل CSF:
جمع CSF قبل بدء العلاج المضاد للميكروبات.
جمع CSF في حاوية معقمة المسمار - وليس في قارورة حقن مع المكونات القطن.
لا تأخير النقل والتحقيقات المختبرية.
النقل في وسيط النقل إذا كان التأخير في المعالجة أمرًا لا يمكن تجنبه.
CSF هو نموذج ثمين ، والتعامل معها بعناية واقتصادية. قد لا يكون من الممكن الحصول على عينة متكررة.
إجراء الفحص المادي مباشرة بعد جمع وتشير النتائج على شكل طلب المختبر.
تخزين عند 37 درجة مئوية ، إذا كان التأخير في المعالجة أمر لا مفر منه.
يتم توضيح خصائص مظهر CSF في الجدول.
الجدول: مظهر وتفسيرات CSF
واضح وعديم اللون عادي
واضح مع تأثير تيندال
(مظهر تألق ضد الضوء الساقط) محتوى عالي من البروتين
واضح انحلال الدم القديم المصفر
واضح أحمر انحلال الدم جديد
النزف المعطوب بالدم المضطرب
عكر أبيض عالي المحتوى أو البروتين
جلطة عكوسة (بعد التخزين بين عشية وضحاها) جلطات الفيبرين
اللعاب
يتم معالجة البلغم في المختبر لإجراء تحقيقات مسبقة للعدوى البكتيرية والفطرية في الجهاز التنفسي السفلي. من الأهمية القصوى في تشخيص مرض السل الرئوي.
حدد حاوية البلغم جيدة الفم واسع ، والتي يفضل التخلص منها ، مصنوعة من مادة بلاستيكية رقيقة ، غير قابلة للكسر ومضادة للتسرب.
امنح المريض حاوية البلغم مع الرقم التسلسلي المختبري المكتوب عليه. أظهر للمريض كيفية فتح وإغلاق الحاوية وشرح أهمية عدم فرك الرقم المكتوب على جانب الحاوية.
اطلب من المريض أن يستنشق بعمق 2-3 مرات ، وأن يسعل بعمق من الصدر ويبصق في وعاء البلغم عن طريق تقريبه إلى الفم.
تأكد من أن عينة البلغم ذات نوعية جيدة. عينة جيدة من البلغم هي سميكة ، قيحية وكافية في كمية (2-3 مل).
امنح المريض حاوية إضافية مع رقم متسلسل مختبري مكتوب عليها لعينة صباحية مبكرة. اشرح للمريض أن يشطف فمه بالماء العادي قبل ترويجه.
بول
في الظروف العادية يكون البول عقيمًا. وعادة ما يتم استعمار الجزء السفلي من مجرى البول والأعضاء التناسلية عن طريق البكتيريا ، وقد يتسبب العديد منها أيضًا في إصابة المسالك البولية. بما أن البول يعد وسيطًا جيدًا للنمو لجميع أنواع البكتيريا ، فإن المجموعة المناسبة والعقيم تفترض أهمية أكبر لهذه العينة.
بالنسبة للفحص الميكروبيولوجي ، يجب جمع البول على شكل عينة "نظيفة في منتصف تيار".
يجب نقل عينات البول إلى المختبر في غضون ساعة واحدة للفحص البكتريولوجي ، وذلك بسبب النمو المستمر للبكتيريا في المختبر وبالتالي تغيير التركيز الفعلي للكائنات الحية.
براز
ينبغي جمع عينات البراز للتشخيص المسبب للمرض للإسهال المعدية الحادة في المرحلة المبكرة من المرض وقبل العلاج بمضادات الميكروبات. ويفضل عينة البراز بدلا من مسحة المستقيم.
لا ينبغي أن تكون عينة البراز ملوثة بالبول.
لا تجمع العينة من مقلاة السرير.
جمع العينة خلال المرحلة المبكرة من المرض وإلى أقصى حد ممكن قبل إدارة العوامل المضادة للميكروبات.
من 1 إلى 2 جم. الكمية كافية.
إذا كان ذلك ممكنا
إن أمكن ، أرسل أكثر من عينة في أيام مختلفة.
يجب استلام عينة البراز الجديدة في غضون 1-2 ساعة من المرور.
متجر في 2-8oC.
ينصح متوسط Cary و Blair المعدل كوسط نقل جيد. إنه وسط مستقر جدًا ويمكن تخزينه للاستخدام في حاويات ملولبة. إنها وسيلة نقل شبه صلبة. يجب تلقيح مسحتين على الأقل. سوف تبقى معظم مسببات الأمراض على قيد الحياة لمدة تصل إلى 48 ساعة في درجة حرارة الغرفة. العينات غير مقبولة إذا تم الاحتفاظ بالوسيط لأكثر من أسبوع واحد أو إذا كان هناك تجفيف قابل للكشف للعينة.
وسائط النقل البديلة هي وسط Venkataraman-Ramakrishnan (V-R fluid) أو ماء peptone قلوي. يجب تحضير سائل VR في زجاجات 30 مل (1 أونصة) من المسمار (زجاجات MacCartney). وهو يحافظ على الأفسس لأكثر من ستة أسابيع ، كما أثبت أنه وسيلة مريحة للغاية للنقل حيث يمكن الاحتفاظ بها في درجة حرارة الغرفة بعد جمع العينة.
مسحة الحلق
أخفض اللسان بشفرة لسان.
مسحة المنطقة الملتهبة من الحلق والبلعوم أو اللوزتين مع مسحة معقمة مع الحرص على جمع القيح أو قطعة من الغشاء.
النقل في أنبوب النقل المعقم.
نخاع العظم
يتم جمع نخاع العظام من قبل طبيب مدرب جيدًا في هذا الإجراء
تطهير الجلد الذي يغطي الموقع من حيث يتم جمع العينات مع 70 ٪ كحول تليها صبغة 2 ٪ من اليود.
نضح 1 مل أو أكثر من نخاع العظام عن طريق الشفط عن طريق الجلد العقيمة.
جمع في أنبوب غطاء المسمار المعقمة.
إرسال للمختبر على الفور.
مسحة مستقيمة
قم بإدخال مسحة ما لا يقل عن 2.5 سم من العضلة العاصرة الشرجية حتى تدخل إلى المستقيم.
قم بتدويره مرة واحدة قبل الانسحاب.
النقل في كاري وبلير أو وسائل النقل الأخرى.
نقل العينات
تتطلب العينات التي يتم إرسالها إلى مختبرات أخرى عناية خاصة للتغليف الآمن للمواد. عادة ما يتم إصدار المبادئ التوجيهية من قبل السلطات الوطنية ويجب اتباعها بدقة. بالنسبة للنقل باليد المحمولة على مسافة قصيرة ، يجب وضع العينة في وضع مستقيم في الرفوف المناسبة. بالنسبة للنقل لمسافات طويلة ، يجب وضعه في ثلاث حاويات ، أي:
الحاوية الأساسية التي تحتوي على العينة وهي مانعة للتسرب مع غطاء ملولب.
حاوية ثانوية متينة ومقاومة للماء ومصنوعة من المعدن أو البلاستيك مع غطاء ملولب. يجب أن يكون لديها مادة امتصاصية كافية لاستيعاب محتويات الحاوية الأولية في حالة كسرها أو تسربها. في الخارج ، يجب لصق تفاصيل العينة.
عادة ما تكون الحاوية الثلاثية مصنوعة من الخشب أو صندوق البطاقة. يجب أن تكون قادرة على تحمل الصدمات والصدمات الناتجة عن النقل. يمكن الاحتفاظ بالثلج الجاف بين هذه الحاوية والحاوية الثانوية إلى جانب مواد ماصة كافية وتوفير للهروب من ثاني أكسيد الكربون لمنع تراكم الضغط داخلها.
بشكل عام ، يجب معالجة معظم العينات في المختبر في غضون ساعة إلى ساعتين بعد الجمع. من الناحية العملية ، قد يكون الحد الزمني من 2 إلى 4 ساعات أكثر عملية خلال يوم العمل العادي. يجب تنظيم المختبر للسماح بمعالجة العينات بمجرد وصولها ، ويجب أن يقتصر جمع معظم العينات على ساعات العمل للمختبر. ومع ذلك ، يجب إجراء بعض الترتيبات للسماح بالمعالجة الأولية للعينات القليلة التي يتعين جمعها خارج ساعات عمل المختبر.
السلامة في المختبرات
تعتبر السلامة المختبرية عنصرا حيويا في عمل أي مختبر. يجب أن تصمم إجراءات السلامة والاحتياطات الواجب اتباعها في مختبر علم الأحياء المجهرية للقيام بما يلي:
تقييد الكائنات الدقيقة الموجودة في العينات أو الثقافات إلى الأوعية التي تحتوي عليها.
منع الكائنات الحية الدقيقة البيئية (الموجودة عادة في اليد أو الشعر أو الملابس أو المقاعد المختبرية أو في الهواء) من دخول العينات أو الثقافات والتدخل في نتائج الدراسات.
مستويات السلامة البيولوجية للمختبر
وقد تم التوصية بأربعة مستويات للسلامة الأحيائية على أساس عدوى العامل / العوامل.
السلامة الحيوية المستوى -1 (BSL-1): الالتزام بالممارسات الميكروبيولوجية المعيارية. لا توجد متطلبات خاصة فيما يتعلق بمعدات الاحتواء.
السلامة الحيوية المستوى 2 (BSL-2): بالإضافة إلى استخدام الممارسة الميكروبيولوجية المعيارية ، فإن المعاطف المختبرية ، وإزالة التلوث من النفايات المعدية ، والوصول المحدود ، والقفازات الواقية وعرض علامة الخطر الحيوي ومعدات الاحتواء الجزئي هي متطلبات هذا المستوى.
تحتاج معظم المختبرات المحيطية والمتوسطة إلى منشآت مختبر BSL-1 أو BSL-2.
BSL-3: بالإضافة إلى BSL-2 ، فإنه يحتوي على ملابس مخبرية خاصة ، والوصول إلى معدات المختبرات واحتواء جزئي.
BSL-4: BSL-3 بالإضافة إلى الدخول من خلال غرفة التغيير حيث يتم وضع الملابس المخبرية ، الاستحمام عند الخروج ، يتم تطهير جميع النفايات قبل الخروج من المرفق. انها اعادة